/ 대한자죽염연구회지

자죽염은 천일염과 대나무를 이용하여 전통적인 방법에 따라 특수 법제한 죽염이다. 자죽염은 우리나라 고유의 전통 민간 의약으로서 다양한 질환의 치료와 예방의 목적으로 이용되었다. 본 연구에서는 인간 비만세포주를 이용하여 자죽염의 항염증 활성을 조사하였다. 자죽염 (1mg/ml)은 mitogen PMA와 calcium ionophore A23187로 자극된 인간

비만세포주에서 종양괴사인자 알파와 인터루킨-1 베타, 인터킨-6의 분비를 각각 67.04□0.08%, 68.01□1.85, 69.48□0.54 억제하였다. 자죽염 (1mg/m)은 인간 비만세포주에서 또한 염증성 사이토카인인 종양괴사인자 알파와 인터루킨-1 베타, 인터루킨-6의 단백질 발현도 억제하였다. 같은 조건에서 자죽염은 종양괴사인자 알파 mRNA 발현도 억제하였다. 대조군으로 NaCl (1mg/ml)을 처리하였을 때 종양괴사인자 알파와 인터루킨-6의 분비는 억제되었으나 효과는 자죽염보다 현저하게 낮았다. 이러한 결과는 자죽염이 염증성 질환의 치료에 기여할 수 있음을 제시해 준다.

자죽염은 천일염을 왕대나무에 다져 넣고 황토로 구멍을 막은다음 가마의 온도를 소나무 장작불로 850∼900□로 8∼10시간 유지하여 대나무를 태운 다음, 거기서 나온 소금기둥을 분쇄하여 다시 대나무에 넣고 굽는 과정을 8회 반복한 후 마지막으로 1500□ 이상의 고열에서 수시간 용융하여 법제한 전통 죽염으로 대한민국 고유의 민족 유산이다. 자죽염은 천연 유황성분에 의한 계란 노른자 냄새가 나는 순하고 부드러운 물질로 다양한 효과가 예상되는 한약재 중의 하나로 일반 소금과는 확실한 차별성을 갖는다. 자죽염은 오래 전부터 민간적으로 각종 염증질환에 유용하게 사용돼 왔고, 세균성 질환 등의 예방과 치료에 효과적으로 응용되어 온 것으로 잘 알려져 있다 (1-4). 그러나 아직까지 가장 쉽게 예상할 수 있는 자죽염의 항염증 활성조차 실험적으로 분명하게 밝혀진 것이 없어 본 연구를 계획하게 되었다.

면역세포에서 분비되는 염증성 세포활성물질은 인체 방어 시스템에서 초기에 분비·발현되는 중요한 단백질이다 (5). 주된 염증성 세포활성물질에는 TNF-□, IL-1□, IL-6 가 있다. TNF-□는 다양한 질병의 병태생리적 반응들을 매개하는 다기능성 세포활성물질이다 (6).  IL-1은 IL-1□와 IL-1□ 2개의 단백질로 구성되어 있으며 활성화된 여러 면역세포에서 분비된다 (7). IL-6은 피부경화증, 건선, 두드러기와 같은 다양한 피부 염증질환 (8-11) 및 간에서 급성단계반응을 일으키는 물질이다 (12). 비만 세포는 면역세포 중에서 염증을 일으키는 주요한 세포이다 (13-15). 인간 비만세포주, HMC-1세포는 자극에 의해 TNF-□, IL-1□, IL-6와 같은 염증성 세포활성물질을 분비하는 세포로 잘 알려져 있다 (16).

이에 본 연구는 자죽염이 일반 소금과는 다르게 인간 비만세포주인 HMC-1세포를 이용한 염증성세포활성물질인 TNF-□, IL-1□, IL-6와 같은 활성물질의 분비억제효과와 활성물질의 단백질 발현억제효과 그리고 TNF-□ mRNA 발현억제효과를 실험적으로 관찰하여 유의성 있는 결과를 얻었기에 이에 보고하는 바이다.

실 험 방 법

실험재료

자죽염은 시중에서 구입하였으며 자죽염과 NaCl은 증류수에 각각 녹인 다음 0.45□ 필터로 여과해서 4□에서 보관하면서 실험에 사용하였다.

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시약

Iscoves Modified Dulbeccos Media (IMDM)은 Gibco BRL (Grand Island, NY USA)로부터, PMA, avidin- peroxidase, 2,2-azio-bis(3-ethylbenz -thiazoline- 6- sulfonic acid),3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-diphenyl te- trazolium  bromide (MTT)와 기타 다른 시약은 Sigma (St. Louis, MO, USA)에서 구입했다. Anti-human TNF-□/IL-1/IL-6 antibody (Ab), biotinylated anti-human TNF-□/IL-1/IL-6 Ab, and recombinant human TNF-□/IL-1/IL-6는 R&D Systems (Minneapolis, MN)에서 구입했다.

Vol.1.No.1(2003) /

세포주 및 세포 배양

HMC-1 세포는 10% FBS와 1% penicillin/ strepto- mycin이 첨가된 IMDM에서 37□, 5% CO2 incubator에서 배양하였다.

MTT 검색법

세포의 생존능력을 관찰하기 위하여 MTT assay를 실행하였다. 10% FBS과 1% penicillin/streptomycin이 들어간  IMDM에 4X105이 되는 세포를 96 well plate에 plating 한 다음 37□에서 20시간 동안 배양하였다. 배양된 배지를버리고 난 다음 신선한 배지를 넣었다. MTT (10 □/well : 5 □/ml)를 첨가하고 4시간동안 다시 배양한 다음 DMSO 100 □로 MTT를 녹인 다음 540nm에서 ELISA reader로 분석했다.

자죽염의 함염활성 연구

신혜영·이은희·김창영·신태용·김상덕·송윤선·이기남·김형민·홍승헌

TNF-□, IL-1□, IL-6 분비의 측정

HMC-1세포의 배양액 내에 분비된 TNF-□, IL-1□와 IL-6의 측정은 Scuderi 등 (17)이 기술한 방법에 준하여 약간 변형된 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)로 실시하였다. 즉 anti-human TNF-□, IL-1□, IL-6 capture 단클론 항체를 96-well plate 에 1 □/ml로 코팅하고 4□에서 12시간 방치하였다. 코팅 후 비 특이적 결합부위를 막기 위하여 2% bovine serum albumin (BSA)를 함유한 phosphate-buffered saline (PBS)로 구성된 blocking buffer를 첨가하여 37□에서 2시간 동안 방치하였다. 다시 0.05% tween 20 을 함유한 PBS로 4회 세척 후 재조합 사람 TNF-□, IL-1□, IL-6 표준액과 각 검체의 배양 상등액을 각 well 에 100 □씩 부가하여 37□에서 2시간 동안 방치하였다. 다시 0.05% tween 20 을 함유한 PBS로 4회 세척 후 biotinylated anti-human TNF-□, IL-1□, IL-6는 1% BSA를 함유한 PBS를 이용하여 0.05 □/ml 농도로 희석한 후 well에 처리하여 37□에서 2시간 동안 방치하였다. 다시 washing buffer로 7회 세척한 후 avidin-conjugated enzyme 을 2.5 □/ml 농도로 각 well에 처리한 다음 37□에서 30분 방치한 후 7회 세척하였다. ABTS 기질액을 각 well 에 100 □씩 가하여 10 분간 발색을 유도한 다음 ELISA reader를 이용하여 405 nm 파장에서 TNF-□, IL-1□와 IL-6의 양을 측정하였다.

TNF-□, IL-1□, IL-6의 Western Blotting- 비만세포내 TNF-□, IL-1□, IL-6의 단백질 발현 수준을 Western Blotting 방법으로 분석하기 위하여 RIPA(-) lysis buffer (PBS 중 1% triton, 1% deoxycholate 및 0.1% NaN3 함유)로 세포를 깬 다음 단백질을 얻어 BCA 용액으로 정량하였다. 50 □의 단백질을 전기영동한 후 nitrocellulose paper에 전이하고 10% skim milk로 1시간 동안 blocking시켰다. PBS-T (PBS에 0.1% tween 20 함유)로 씻어낸 후, TNF-□,IL-1□, IL-6 항체를 1시간동안 처리하였다. PBS-T로 씻어낸 후, 2차 항체를 30분간 처리하고 ECL detection 용액으로 확인하였다.

TNF-□, IL-1□, IL-6의 Western Blotting

비만세포내 TNF-□, IL-1□, IL-6의 단백질 발현 수준을 Western Blotting 방법으로 분석하기 위하여 RIPA(-) lysis buffer (PBS 중 1% triton, 1% deoxycholate 및 0.1% NaN3 함유)로 세포를 깬 다음 단백질을 얻어 BCA 용액으로 정량하였다. 50 □의 단백질을 전기영동한 후 nitrocellulose paper에 전이하고 10% skim milk로 1시간 동안 blocking시켰다. PBS-T (PBS에 0.1% tween 20 함유)로 씻어낸 후, TNF-□,IL-1□, IL-6 항체를 1시간동안 처리하였다. PBS-T로 씻어낸 후, 2차 항체를 30분간 처리하고 ECL detection 용액으로 확인하였다.

RT-PCR analysis

Total RNA는 Easy-blue를 사용하여 사람 비만세포주인 HMC-1세포로부터 분리하였다. TNF-□ primer는 5□CGG GAC GTG GAG CTG GCC GAG GAG3□; 5□CAC CAG CTG GTT ATG GTT ATC TCT CAG CTC3□이고 □-actin(5□GTG GGG CGC CCC AGG CAC CA3□; 5□GTC CTT AAT GTC ACG CAC GAT TTC3□)로 하였다. PCR을 위한 annealing 온도는 60□, TNF-□와□-actin의 증폭된 단편 크기는 각각 355bp, 661bp이었다. 생성물은 1.5% agrose gel에 전기 영동하여 ethidium bromide로 염색하여 관찰하였다.

통계학적 분석

실험결과는 mean□SEM로 표시하였으며 Student□s t-test를 실시하여 유의성을 검증하였다.

실 험 결 과

인간 비만 세포주로부터 자죽염에 의한 염증성 사이토 카인의 억제

자죽염처리에 의한 PMA와 A23187에 의해 자극된 HMC-1 세포로부터 분비되는 TNF-□, IL-1□, IL-6의 분비 억제 효과를 분석하였다. 배양 상층액에서 ELISA 방법에 의해 각각의 세포활성물질 수준을 정량한 결과, Table 1에 나타낸 바와 같이 자죽염 (1mg/ml)은 PMA와 A23187로 자극된 HMC-1 세포로부터 TNF-□, IL-1□, IL-6의 분비를 각각 67.04□0.08, 68.01□1.85, 69.48□0.54% 억제시켰다. NaCl도 TNF-□, IL-6의 분비를 억제하였으나 자죽염보다 현저히 낮은 효과를 나타냈다. IL-1□의 분비는 NaCl에 의해 억제효과가 없었다(data not shown). 자죽염과 NaCl은 0.01-1mg/ml의 농도 범위에서 인간 비만세포의 생존도에는 별다른 영향을 미치지 않았다 (Fig. 1).

TNF-□, IL-1□, IL-6 단백질 발현 억제 효과

염증성 세포활성물질인 TNF-□, IL-1□, IL-6의 사람 비만세포 내 단백질 발현에 있어서 자죽염의 효과를 알아보기 위해 western blotting을 수행하였다. PMA와 A23187에 의해 자극된 비만세포내의 TNF-□, IL-1□, IL-6의 발

현량은 예상대로 증가되었으며, 자극하기 30분전에 자죽염

을 처리한 실험군에서는 TNF-□, IL-1□, IL-6의 발현이

억제되었다 (Fig. 2).

TNF-□ mRNA 발현 억제 효과

마지막으로 자죽염처리에 의한 PMA와 A23187에 의해 자극된 HMC-1 세포로부터 TNF-□ mRNA의 발현 억제효과를 RT-PCR 방법으로 조사하였다. □-actin은 대조군으로서 사용하였다. Fig. 3에 나타낸 것처럼 자극하지 않은 HMC-1 세포는 TNF-□ mRNA가 거의 발현되지 않았으나 PMA와 A23187에 의해 자극된 HMC-1 세포는 TNF-□ mRNA 발현이 증가하였는데, 자죽염 처리군은 TNF-□ mRNA 발현이 현저하게 억제되었다 (Fig. 3).

Table 1. Effect of purple bamboo salt on the secretion of PMA plus A23187-stimulated TNF-□, IL-1□, IL-6 in HMC-1 cells

Treatment	Concen- tration (mg/ml)	Inhibition (%)
		TNF-□	IL-1□	IL-6
Saline	-	-	-	-
Purple bamboo salt	0.01	26.15□1.35	7.09□0.13	7.13□3.45
	0.1	46.12□0.15	59.03□2.09*	45.03□1.32*
	1	67.0□0.08*	68.0□0.05*	69.5□0.54*
NaCl	1	24.42□1.58*	-	27.57□1.82

PMA plus A23187-stimulated HMC-1 cells (3 □ 105) were incubated for 6 h in the absence or presence of purple bamboo salt or NaCl. TNF-□, IL-1□, IL-6 secreted into the medium are presented as the mean□SEM of three independent experiments. *P<0.05: significantly different from the saline value.

Fig. 2 - Inhibition of TNF-□, IL-1□, IL-6 protein expression by purple bamboo salt in HMC-1 cells. the protein extracts were prepared and samples were analyzed for TNF-□, IL-1□, IL-6 expression by Western blotting as described in the method. Lane 1, Saline; Lane 2, Positive control (PMA+A23187); Lane 3,  PMA+A23187+purple bamboo salt (1mg/ml)

Fig. 3 - Effect of purple bamboo salt on the expression of TNF-□ mRNA in HMC-1 cells by RT-PCR. Total RNA was isolated from HMC-1 cells. HMC-1 cells were pretreated with purple bamboo salt for 30 min prior to PMA plus A23187 stimulation. Lane 1, control; Lane 2,  PMA plus A23187; Lane 3, PMA plus A23187 plus purple bamboo salt (1 mg/ml).

고   찰

자죽염은 일반 죽염과는 달리 천일염을 왕대나무에 넣고 9회 이상 특수한 조건하에서 법제한 것으로 예로부터 염증성 질환이나 세균성 질환에 사용되어 왔다. 자죽염의 주요 물질인 소금은 한의학적으로 鹹味를 가지고 있으며, 성질이 寒하고 무독하여 胃·腎·大腸·小腸에 작용하고 宿食이나 痰涎, 독물을 체외로 吐出시키며, 음식을 소화시키는 효능이 있다고 보고되고 있다. 鹹味를 가지고 있어 부종이 있는 경우에는 忌하라고 하였다. 또한 자죽염 제조시 사용하는 왕대나무는 굽는 과정에서 竹瀝이라는 액즙이 유출되는데 竹瀝은 甘寒 무독하고 心·肺·胃에 작용하는데 淸熱化痰, 鎭驚利竅하여 中風의 痰飮에 생강즙과 같이 복용하는 등 痰으로 인한 병증이나, 객담이나 短氣, 咳嗽 등에 주로 사용한다. 성질이 寒하여 寒嗽, 脾虛便□의 경우에는 사

용을 주의하여야 한다 (18).

이와 관련하여 서양의학적으로 죽염은 위염, 위궤양, 소화기계통의 질환에 대한 효과와 외상치료, 해독작용에 대한 효과가 보고되었으며 (19, 20), 또한 죽염을 혼합한 양치액이 구강내 연쇄상구균의 수를 감소시키고, 치은염의 증상을 완화시킨다는 실험결과가 발표되는 등 죽염의 약리작용을 과학적으로 확인, 규명하고자 하는 시도가 행해지고 있다 (21-23).

본 연구에서는 자죽염이 염증을 일으키는 주요한 면역세포인 인간 비만세포를 이용하여 염증성 세포활성물질인  TNF-□, IL-1□, IL-6 등에 대한 발현 수준의 변화 및 분비 억제 효과를 관찰 하였다.

TNF-□, IL-1□, IL-6는 활성화된 비만세포에서 분비되는 대표적 염증 유발 물질이다. TNF는 다양한 세포 타입에서 발현하고 있으며 TNF의 증가는 endotoxemia와 septic shock과 같은 폐질환, 신진대사·병리적인 과정을 유도한다 (24, 25). TNF는 또한 골수종에서 세포의 hematopoietic 분화 요소로 중요하고, 항 바이러스 활성을 가지고 있다고 보고됐다 (26-29).  IL-1의 활성은 TNF 활성의 범위와 유사하고, 염증과정, endothelial 세포에 leukocytes의 부착과 연골조직의 퇴화에 중요한 역할을 한다 (29, 30). 최근에는 관절염 환자에서 연골 주변에 증가된 비만 세포에 의해 염증성 사이토카인이 증가하고 연골퇴화, 염증을 가중시킨다고 보고했다 (31).

IL-6는 급성 단계 단백질을 유도하고 albumin과 transferrin 생산을 감소시킨다 (32 -34). IL-6은 염증성 사이토카인 TNF, IL-1의 분비를 억제하고 염증 자리로 염증 세포의 유입을 감소시킨다 (35-38).

본 실험의 결과에서 자죽염은 PMA와 A23187로 자극된 인간 비만세포로부터 TNF-□, IL-1□, IL-6와 같은 염증성 세포활성물질의 분비를 모두 분명하게 억제하였다. 같은 조건에서 자죽염은 TNF-□, IL-1□, IL-6의 단백질 발현도 억제하였다. 본 실험에 사용한 자죽염과 NaCl의 농도는 비만 세포 독성에는 영향을 미치지 않았다. Sohn 등은 자죽염의 pH가 항균에 영향을 준다고 보고하였다 (39). 본 실험 과정 중 자죽염과 NaCl의 pH 차이를 비교한 결과 자죽염은 NaCl보다 pH가 높았다 (data not shown). 그리고 자죽염처리에 의한 PMA와A23187에 의해 자극된 인간 비만세포로부터 TNF-□mRNA의 발현억제효과를 RT-PCR

방법으로 관찰한 결과 TNF-□mRNA발현을 현저히 억제시켰다. 특정 만성 염증 환자에서 증가된 염증성 세포활성물질은 해당 질환에 의한 사망율의 증가 및 질병의 예후 등과 밀접한 관련이 있다 (40).

결론적으로 자죽염은 임상적으로 각종 염증 질환의 치료 보조제 등으로 유용하게 사용할 수 있을 것으로 생각된다.

결   론

한국의 전통민간의약인 자죽염의 항염 활성도를 관찰하기 위하여 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)와 A23187로 자극된 인간비만세포(HMC-1세포)로부터 분비되는 대표적 염증 유발 세포활성물질인 tumor necrosis factor-□ (TNF-□), IL-1□, IL-6 의 발현수준의 변화 및 분비억제 효과는 다음과 같다.

1. 자죽염은 PMA와 A23187로 자극된 인간비만세포로부터 염증성 세포활성물질인 TNF-□, IL-1□, IL-6 의 분비를 세포독성에 영향을 주지 않는 농도에서 각각 최고 67.0□0.08%, 68.0□0.05%, 69.5□0.54% 씩 억제시켰다.

2. 자죽염은 PMA와 A23187로 자극된 인간비만세포로부터  염증성 세포활성물질인 TNF-□, IL-1□, IL-6 단백질 발현을 모두 억제시켰다.

3. 자죽염은 PMA와 A23187로 자극된 인간비만세포로부터 TNF-□ mRNA의 발현도 대조군에 비하여 현저하게 억제시켰다.

이런 결과는 현재까지 민간요법 수준에서 각종 염증 질환에 유익하게 사용돼 온 자죽염의 효과를 직접적으로 증명한 매우 중요한 자료를 제시한 것으로 장차 보다 구체성 있는 연구가 계속되면 우리 조상들께서 왜 자죽염을 만들어 이용해 왔는지 조금이나마 이해할 수 있게 될 수 있을 것으로 사료된다.

참 고 문 헌

1. Kim JB, Paik DI, Moon HS, Jin BH , Park DY.  A study on the effects of cetylpyridinim chloride and purple bamboo salt containing mouth rinse on the number of streptococcus mutans and plaque index. J Kor Acad Dent Health 1993; 17: 176-86.

2. Min BS, Choi HY, Choi YJ, Hong JP, Chun YH,  Kang NH. The reducing effects on dental plaque formation and gingiritis of toothpastes containing purple bamboo salt and several herb medicines. J Kor Dent Ass 1995; 33:65-71.

3. Yang JS, Kim OH, Chung SY, Yoo TM, Roh YN,  Yi SY, Chung MW, Ahn MR, Choi HJ, Rheu HM. Pharmacological evaluation of purple bamboo salt. J Appl Pharm 1999; 7:178-84.

4. Huh K, Kim YH, Jin DQ. Protective effect of an aged garlic-purple bamboo salt mixture on the rat with the alcohol-salicylate induced gastropathy. Yakhak Hoeji 2001; 45:258-68.

5. Goeddel DV, Aggarwal BB, Gray PW, Leung DW, Nedwin GE, Palladino MA, Patton JS, Pennica D, Shepard HM, Sugarman BJ, et al. Tumor necrosis factors: gene structure and biological activities. Cold Spring Harb Symp Quant Biol 1986; 51:597-609

6. Lederer JA, Czuprynski CJ. In: Myers MJ, Mur- taugh MP. Cytokines in animal health and disease. New York: Marcel Dekker 1995 p. 59

7. Koj A. In: Allisons AC, Koj A. The acute-phase response to injury and infection. Amsterdam: Elsevier Science 1985 p.139.

8. Grossman RM, Krueger J, Yourish D, Granelli- Peperno A, Murphy DP, May LT,  Kupper TS, Sehgal PB, Gottlieb AB. Interlukin-6 is expressed in high levels in psoriatic skin and stimulates proliferation of cultured human keratinocytes. Proc Natl Acad Sci USA 1989; 86:6367-71.

9. Gurram M, Pahwa S, Frieri M. Increased interlukin-6 production in peripheral blood mononuclear cells from patients with systemic sclerosis. J Allergy Clin Immunol 1992; 89:291-3.

10. Lawlor F, Bird C, Camp RDR, Barlow R, Barr RM, Kobza-Black A, Judge MR, Greaves MW. Increased interlukin-6, but reduced interlukin 1, in delayed pressure urticaria. Br J Dermaltol 1993; 128:500-3.

11. Suzuki H, Takemura H, Yoshizaki K,  Koishihara Y, Ohsugi Y, Okano A,  Akiyama Y, Tojo T, Kishimoto T, Kashiwagi H. IL-6-anti-IL-6 autoantibody complexes with IL-6 activity in sera from some patients with systemic sclerosis. J Immunol 1994; 152:935-42.

12. Kushner I, Macintyre SS, Schultz D. Biosynthesis of C-reactive protein. Ann N Y Acad Sci 1982; 389:76-87.

13. Combs JW, Laguno D, Benditt EP. Differentiation and proliferation of embryonic mast cells in the rat. J Cell Biol 1965; 25:577-92.

14. Desaga JF, Parwareserch MR, Muller-Hermeling HK. Die zytochemische identification der mastzellvorstufen bei der ratte. Z Zellforsch 1971; 121:292-300.

15. Satio H, Hatake K, Dvorak AM, Leiferman KM, Dannenberg AD, Arai N,  Ishizaka K, Ishizaka T. Selective differenciation and prolifeation of hematopoietic cells induced by recombinant human interleukins. Proc Natl Acad Sci USA 1988; 85:2288-92.

16. Grabbe J, Welker P, Moller A, Dippel E, Ashman LK, Czarnetzki BM. Comparative cytokine release from human monocytes, monocyte-derived immature mast cells, and a human mast cell line (HMC-1). J Invest Dermatol 1994; 103:504-8.

17. Scuderi P, Sterling KE, Lam KS, Finley PR, Ryan KJ , Ray CG, Petersen E, Slymen DJ, Salmon SE. Raised serum levels of tumor necrosis factor in parasitic infections. Lancet 1986; 2:1364-5.

18. 신민교. 임상본초학, 서울, 영림사, 1997, pp.759-760, 815-816.

19. 이수민. 한국인산죽염에 의한 흰쥐 미란성 위염의 예방과 치료작용 관찰, 한국인산죽염 임상 및 기초실험연구보고 논문집, 1993, pp.79-85.

20. 김승희, 강석연, 정기경, 김태균, 한형미, 류항묵, 문애리. 죽염의 특성분석과 항위궤양효과, 한국식품위생안전성학회지, 1998;13(3):252-257.

21. 강명신, 김형규, 권호근, 김종열. 죽염과 염화세틸피리디늄 배합양치액의 치은염 억제에 미치는 영향에 관한 임상실험연구, 대한구강보건학회지, 1995 ; 19(2): 219-227.

22. 김종배, 백대일, 문혁수, 진보형, 박덕영. Cetylpyri- dinium chloride 및 죽염 배합양치용액의 구강다형연쇄상구균수 및 치면세균막형성에 미치는 영향에 관한 실용실험적 연구, 대한구강보건학회지, 1993 ; 17(1) : 176-186.

23. 양지선, 김옥희, 정수연, 유태무, 노용남, 이숙영, 정면우, 안미령, 최현진, 류항묵. 죽염의 약리작용 평가, 응용약물학회지, 1999 ; 7 : 178-184.

24. Tracey K.j. Tumor necrosis factor (cachectin) in the biology of septic shock syndrome. Circ Shock 1991; 35;123-8.

25. Rutherford MS, Witsell A, Schook LB. Mechanisms generating functionally heterogeneous macrophages: chaos revisited. J Leuk Biol 1993; 53:602-18.

26. Ike H, Sasaki O, Yamada A, Imanishi J. Inhibitory effects of tumor necrosis factor (TNF) and its combination with interferons on the syncytium formation by bovine leukemia virus (BLV) and on the multiplication of BLV. Nippon Juigaku Zasshi 1990 ; 52 : 869-71.

27. Paez E, Garcia F, Gil Fernandez C. Interferon cures cells lytically and persistently infected with African swine fever virus in vitro. Arch Virol 1990; 112:115-27.

28. Ohno K, Nakano T, Matsumoto Y, Watari T, Goitsuka R, Nakayama H, Tsujimoto H, Hasegawa A. Apoptosis induced by tumor necrosis factor in cells chronically infected with feline immunodeficiency virus. J Virol 1993; 67:2429-33.

29. Tyler JA, Benton HP. Synthesis of type II collagen is decreased in cartilage cultured with interleukin 1 while the rate of intracellular degradation remains unchanged. Coll Relat Res 1988; 8:393-405.

30. Richards CD, Rafferty JA, Reynolds JJ, Saklatvala J. Porcine collagenase from synovial fibroblasts: cDNA sequence and modulation of expression of RNA in vitro by various cytokines. Matrix 1991; 11:161-7.

31. Malone DG, Wilder RL, Saavedra-Delgado AM, Metcalfe DD. Mast cell numbers in rheumatoid synovial tissues. Correlations with quantitative measures of lymphocytic infiltration and modulation by antiinflammatory therapy. Arthritis Rheum 1987; 30 : 130-7.

32. Andus T, Geiger T, Hirano T, Northoff H, Ganter U, Bauer J, Kishimoto T, Heinrich PC. Recombinant

human B cell stimulatory factor 2 (BSF-2/IFN-beta 2) regulates beta-fibrinogen and albumin mRNA levels in Fao-9 cells. FEBS Lett 1987; 221:18-22.

33. Andus T, Geiger T, Hirano T, Kishimoto T, Tran-Thi TA, Decker K, Heinrich PC. Regulation of synthesis and secretion of major rat acute-phase proteins by recombinant human interleukin-6 (BSF-2/IL-6) in hepatocyte primary cultures. Eur J Biochem 1988; 173:287-93.

34. Morrone G, Ciliberto G, Oliviero S, Arcone R, Dente L, Content J, Cortese R. Recombinant interleukin 6 regulates the transcriptional activation of a set of human acute phase genes. J Biol Chem 1988 ; 263 : 12554-8.

35. Aderka D, Le JM, Vilcek J. IL-6 inhibits lipopoly- saccharide-induced tumor necrosis factor production in cultured human monocytes, U937 cells, and in mice. J Immunol 1989; 143:3517-23.

36. Schindler R, Mancilla J, Endres S, Ghorbani R, Clark SC, Dinarello CA. Correlations and interaction

in the production of interleukin-6 (IL-6), IL-1, and tumor necrosis factor (TNF) in human blood mononuclear cells: IL-6 suppresses IL-1 and TNF. Blood 1990; 75:40-7.

37. Ulich TR, Yin S, Guo K, Yi ES, Remick D, del Castillo J. Intratracheal injection of endotoxin and

cytokines. II. Interleukin-6 and transforming growth factor beta inhibit acute inflammation. Am J Pathol 1991 ; 138 : 1097-101.

38. Ulich TR, Guo K, Yin S, del Castillo J, Yi ES, Thompson RC, Eisenberg SP. Endotoxin-induced

cytokine gene expression in vivo. IV. Expression of interleukin-1 alpha/beta and interleukin-1 receptor antagonist mRNA during endotoxemia and during endotoxin-initiated local acute inflammation. Am J Pathol 1992; 141:61-8.

39. Sohn WS, Yoo YC, Kim CY. The effect of NaCl and purple bamboo salt on the growth of various oral bacteria. J Kor Acad Dent health 1991; 15:255-67.

40. Stenvinkel P. Inflammatory and atherosclerotic interactions in the depleted uremic patients. Blood Purif 2001; 19:53-61.